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HIV实验室SOP文件54


三、标本管理制度
(一) 、样品的采集和处理 艾滋病检测最常用的样品是血液,包括血清、血浆和全血。唾液或尿液有时 也可作为测试样品。常用的血液样品的采集和处理方法如下: 1、血清样品采集和处理 (1) 、用一次性注射器(或真空采血管)抽取一定量静脉血,室温下自然放 置 1?2h,待血液凝固、血块收缩后再用 3000r/min 离心 15min,吸出血清备用。 (2) 、如用滤纸片采样,则手指或耳垂局部严格按常规进行消毒,在刺破皮 肤后,迅速把滤纸片沾上,切勿让血液滴落在其它物体表面造成污染。采血后要 待血样干燥后再包装送检。 2、抗凝血样品采集和处理 (1) 、用加有抗凝剂的真空采血管(或一次性注射器抽取静脉血,转移至加 有抗凝剂的试管) ,反复轻摇,分离血浆和血细胞备用。 (2) 、应根据实验要求选用适当的抗凝剂,如 CD4+/CD8+T 淋巴细胞测定可
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SOP-MY-HIV-5
第 1 版第 1 次修改 第 7 页 共 70 页

选用 K3EDTA 或肝素或枸橼酸钠, HIV 病毒分离、 核酸定性/定量检测可选用 K3EDTA 或枸橼酸钠。 (3) 、用于核酸定性检测时,采集的抗凝全血应在 4~8h 内分离 PBMC 和血 浆,否则应在 24~48h 内分离血浆和血细胞。 3、采集样品注意事项 (1) 、采集样品原则上应按临床采血技术规范操作。 (2) 、采集样品时应注意安全,建议采用真空采血管及蝶形针具,以避免直 接接触血液;直接接触 HIV 感染者/艾滋病(AIDS)病人血液/体液的操作,应戴 双层手套。 (3) 、所有的血液、血清、未固定的组织和组织液样品,均应视为有潜在传 染性,都应以安全的方式进行操作。 (4) 、应象操作未知传染风险样品一样,小心存放、拿取和使用所有可能有 传染性的质量控制和参考物质。用后的包裹应进行消毒。 (5) 、采血时一定要注意安全,采血用一次性注射器,谨慎操作,防止发生 刺伤皮肤和造成外界污染。 (6) 、离心机要使用密闭的罐和密封头,以防液体溢出或在超 /高速离心时 形成气溶胶。 (二)样品的保存 1、用于抗体检测的血清或血浆样品,应存放于-20℃以下,短期(1 周)内 进行检测的样品可存放于 2-8℃。 2、用于抗原和核酸检测的血浆和血细胞样品应冻存于-20℃以下,进行病毒 RNA 检测的样品如需保存 3 个月以上应置于-80℃。 3、 用于 CD4+/CD8+T 淋巴细胞测定的样品不能长期保存, 样品采集时间超过 48h 则不可检测。 (三)样品的运送 1、实验室间传递的样品应为血清或血浆,除特殊情况外一般不运送全血。 2、应采用 WHO 提出的三级包装系统: 第一层容器:装样品,要求防渗漏。样品应置于带盖的试管内,试管上应有

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第 1 版第 1 次修改 第 8 页 共 70 页

明显的标记,标明样品的编号或受检者姓名、种类和采集时间。在试管的周围应 垫有缓冲吸水材料,以免碰碎。随样品应附有送检单,送检单应与样品分开放置。 第二层容器:要求耐受性好、防渗漏、容纳并保护第一层容器,可以装若干 个第一层容器。将试管装入专用带盖的容器内,容器的材料要易于消毒处理。 第三层容器:放在一个运输用外层包装内,应易于消毒。在第三层容器外面 要贴标签(数量,收、发件人) 。 3、血清和血浆样品应在 2~8℃条件下由专人运送。用于 CD4+/CD8+T 淋巴细胞 测定的样品应在室温下 18~23℃运送。每一包装的体积以不超过 50ml 为宜。 4、运送感染性材料必须有记录。 5、如分离血浆仍有困难,可直接将抗凝血-20℃以下冻存,采用冰壶冷藏运 输,避免冻融。 6、特殊情况下如需对个别样品进行复测,可以用特快专递形式投寄,但必 须按三级包装系统将盛样品的试管包扎好,避免使用玻璃容器,以保证不会破碎 和溢漏。 (四)样品的接收 1、含有感染性样品的包裹必须在具有处理感染源设备的实验室内由经过培 训的、穿戴防护衣的工作人员打开,用后的包裹应进行消毒。 2、核对样品与送检单,认真核对标本上病人姓名、年龄、性别、病区、床 号、住院号是否与申请单符合。检查样品管有无破损和溢漏,如发现溢漏应立即 将尚存留的样品移出,对样品管和盛器消毒,同时报告有关领导和专家。 3、检查样品的状况,观察标本的量、标本类型、是否抗凝或有小凝块样品, 记录有无严重溶血、微生物污染、血脂过多以及黄疸等情况,判断标本是否符合 检验要求。如果污染过重或者认为样品不能被接受,则应将样品安全废弃。并要 将样品情况立即通知送样人。 4、打开标本容器时要小心,以防内容物泼溅。样品处理时若内容物有可能 溅出,则应在生物安全柜中戴手套进行。同时应戴口罩、防护眼镜,以防皮肤或 粘膜污染。 5、因特殊临床治疗导致自发荧光的样品不可用于荧光方法测试。

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第 1 版第 1 次修改 第 9 页 共 70 页

6、接收样品时应规范填写样品接收单。 7、不符要求的标本,必须及时填写退回理由单,及时通知送样人,说明情 况,重新留取。不符要求的标本与可疑含有感染性样品用后的包裹同检验后的标 本一样进行消毒或无害化处理后废弃。 (五)标本检测 1、离心机要使用密闭的罐和密封头,以防液体溢出或在超/高速离心时形成 气溶胶。复核标本接收过程中的每一步骤,在检测过程中,应严格按照标准化操 作规程。 2、在标本足够的情况下,不能浪费、随意丢弃或损坏标本。应象操作未知 传染风险样品一样,小心存放、拿取和使用所有可能有传染性的质量控制和参考 物质。用后的包裹应进行消毒 (六) 、标本处理 检验标本先用含 2-3g/L 有效氯消毒剂浸泡半小时,再用高压锅高压消毒。 然后用双层专用黄色医用垃圾袋专人收集所有废弃医用垃圾。送专门存放医用垃 圾处统一焚化处理。并做好登记。

四、试剂管理制度
(一) 、采购与审批 科主任根据需要定期拟定采购计划,交由院领导审批,批核后由科主任与供 应商联系进货。 (二) 、验收与登记 仓管负责人根据供应商提供的试剂及清单对数量、品种、品牌、包装等进行 验收,并将入库数据登记。 (三) 、贮存 冷藏试剂统一存放在 HIV 实验室专用的冰箱内,冷箱保管及温度控制由仓管 负责人负责。HIV 试剂一般应 2~8℃避光保存,在有效期内使用。 (四) 、出库管理 各室提出试剂申领,仓管人填写出库单据,认领人签名后出库。
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