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HIV实验室SOP文件54


九、消防安全制度
1、根据“谁主管、谁负责”的原则,实行科室负责制。 2、主管领导和保卫科对全体职工经常进行消防安全教育,提高思想认识, 掌握消防知识和消防器材的使用。 3、严格执行《安全防火管理制度》各种火种与易燃易爆物品,必须严格分 区,保持一定的安全距离。实验室实施单向流向制度,通道不得乱堆放易燃爆物 品和杂物。 4、严禁在实验室内吸烟。 5、电器的安装与拆除,必须由电工进行,严禁乱接电源,乱后电线。 6、各种机电设备、高温电器设备、耐高压容器和设施,使用时必须有专人 负责,随时检查,消除隐患,严防事故发生。 7、各防火区域设置的消防器材和设备,应定期进行检查,维修和更换,随 时处于完好状态,并不得随便挪动。 8、任何人发现火、水灾等隐患者,必须及时向科领导报告。科主任及时向 院领导报告,及时做好善事处理工作。

十、生物安全防护制度
1、上岗工作人员应是经过岗前安全与技术培训,取得合格证,具有独立工 作能力的人员。 2、进入实验室应穿隔离衣、戴手套,必要时(如对筛查阳性标本进行复测 或检测高危标本)要戴防护眼镜,防止污染暴露的皮肤和衣物。 3、严格按照操作规程操作。操作过程中,不得用戴手套的手触摸暴露的皮
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肤、口唇、眼睛、耳朵和头发等。

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第 1 版第 1 次修改 第 14 页 共 70 页

4、操作时可能发生的触电、失火、玻璃割伤、针头刺伤、烧伤、不慎中毒、 传染性标本的污染,有应急处理的方法,有关工作人员均应熟悉。 5、操作中手套破损,应立即丢弃,洗手后戴上新手套继续操作,不慎发生 泻漏,应立即按照《发生职业暴露后的处理措施》 ,进行处理。 6、防止腐蚀、灼伤、中毒、火灾和爆炸等事件发生。 7、实验操作完毕后,应按照实验室清理与消毒程序,进行善后处理。同时 记录相关资料与数据并存档。 8、工作结束后,应先洗戴手套的手,然后脱去手套丢弃,再脱去工作衣, 用肥皂和流动水洗手后离开实验室。 9、注意安全,随手关门,做好水,电,门的安全保卫工作,防火防盗防水。

十一、职业暴露的防护及处理措施
HIV 检测实验室职业暴露是指检验工作人员在从事检测工作过程中意外 被艾滋病病毒感染者或者艾滋病病人的血液、体液污染了皮肤或者粘膜,或者被 含有艾滋病病毒的血液、体液污染了的针头及其他利器刺破皮肤,有可能被艾滋 病病毒感染的情况。 (一) 、防护措施: 1.医务人员进行有可能接触病人血液、体液的诊疗和护理操作时必须戴手 套,操作完毕,脱去手套后立即洗手,必要时进行手消毒。 2.在诊疗、护理操作过程中,有可能发生血液、体液飞溅到医务人员的面 部时,医务人员应当戴手套、具有防渗透性能的口罩、防护眼镜;有可能发生血 液、体液大面积飞溅或者有可能污染医务人员的身体时,还应当穿戴具有防渗透 性能的隔离衣或者围裙。 3.医务人员手部皮肤发生破损,在进行有可能接触病人血液、体液的诊疗 和护理操作时必须戴双层手套。 4.医务人员在进行侵袭性诊疗,护理操作过程中,要保证充足的光线,并 特别注意防止被针头、缝合针、刀片等锐器刺伤或者划伤。
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第 1 版第 1 次修改 第 15 页 共 70 页

5.使用后的锐器应当直接放入耐刺、防渗漏的利器盒,也可使用具有安全 性能的注射器、输液器等医用锐器,以防刺伤。 6.禁止将使用后的一次性针头重新套上针头套。禁止用手直接接触使用后 的针头、刀片等锐器。 (二) 、处理措施: 1.用肥皂液和流动水清洗污染的皮肤,用生理盐水冲洗粘膜。 2.如有伤口,应当在伤口旁端轻轻挤压,尽可能挤出损伤处的血液,再用 肥皂液和流动水进行冲洗,禁止进行伤口的局部挤压。 3.受伤部位的伤口冲洗后,应当用消毒液,如 75%的酒精或者 0.5%的碘伏 等进行消毒,并包扎伤口;被暴露的粘膜,应当反复用生理盐水冲洗干净。 4.在暴露后的 0 周、第四周、第八周、第十二周及六个月时抽血进行检测 艾滋病病毒抗体。 5.预防性用药应当在发生艾滋病病毒职业暴露后尽早开始,最好在四小时 内实施,最迟不得超过二十四小时;即使超过 24 小时,也应当实施预防性用药, 连续使用 28 天。 6.发生艾滋病病毒职业暴露后立即通知院感科备案、评估。

十二、筛查检验程序
1、筛查试剂 必须是经国家食品药品监督管理局注册批准、批批检合格、在有效期内的试 剂。推荐使用经临床质量评估敏感性和特异性高的试剂。 2、筛查方法 (1) 、常用的筛查方法是酶联免疫试验(ELISA) 目前国内外主要使用第三代(双抗原夹心法)试剂,少数使用第二代试剂。 血源筛查仍以第三代 ELISA 为主, 国际上有些国家和地区已将线性免疫酶测定 (第 四代 ELISA 试剂)用于血源筛查。第四代 ELISA 试剂是最近发展起来的 HIV 抗原 抗体联合测定试剂, 可同时检测 P24 抗原和抗 HIV-1/2 抗体。 与第三代抗 HIV-1/2 试剂相比,检出时间提前了 4~9d。其优点在于能同时检测抗原抗体,降低血源
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筛查的残余危险度。

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第 1 版第 1 次修改 第 16 页 共 70 页

(2) 、快速检测(RT)及其它检测 随着对 HIV 感染者和 AIDS 病人抗逆转录病毒治疗的进展, 及对无症状 HIV 感 染者提供自愿咨询检测(VCT)的迫切需求,简便、快速的 HIV 检测方法被广泛 应用。常用的主要有以下几种: ①、明胶颗粒凝集试验(PA) :PA 是 HIV 血清抗体检测的一种简便方法,是 将 HIV 抗原致敏明胶颗粒作为载体, 与待检样品作用, 混匀后保温 (一般为室温) 。 当待检样品含有 HIV 抗体时,经抗原致敏的明胶颗粒与抗体发生抗原-抗体反应, 根据明胶颗粒在孔中的凝集情况判读结果。PA 试剂有两种,HIV-1 和 HIV-2 抗原 共同致敏的 PA 试剂(AFD HIV-1/2 PA) ,已经我国食品药品监督管理局(SFDA) 注册批准;HIV-1、HIV-2 抗原分别致敏的 PA 试剂(SERODIA-HIV-1/2)可初步区 分 HIV-1 型和 HIV-2 型,目前我国尚未引进。 ②、斑点 EIA 或称斑点 ELISA(dot-EIA) :以硝酸纤维膜为载体,将 HIV 抗 原滴在膜上成点状,即为固相抗原。加血清样品作用,以后步骤同 ELISA。阳性 结果在膜上抗原部位显示出有色斑点。反应时间在 10 min 以内,使用抗原量少。 ③、斑点免疫胶体金(或胶体硒)快速试验:与斑点 EIA 相似,也是以硝酸 纤维膜为载体。区别在于不用酶标记抗体,而代之以红色的胶体金(或胶体硒) A 蛋白,用渗滤法作为洗涤方法。试剂稳定,可室温长期保存。试验时不需任何 设备,迅速、简便、特异性较好,敏感性约相当于中度敏感的 ELISA,适用于应 急检测、门诊急诊个体检测。目前已有在国内被 SFDA 批准注册的国外进口试剂 和国内产品。一般可在 10~30min 内判读结果。 ④、艾滋病唾液检测卡:在硝酸纤维膜上包被人工合成的 HIVgp41/gp36 蛋 白抗原,可同时检测含在唾液中的 HIV-1/HIV-2 抗体,原理为酶免疫间接法。主 要检测唾液中的 HIV IgA 与 IgG 抗体,敏感性特异性与 ELISA 相近,可避免静脉 穿刺。但样品预处理时间长且售价较高。以唾液为样品测定 HIV 抗体的 ELISA、 免疫印迹法(WB)试剂已经美国 FDA 批准。 ⑤、其它快速筛查试验方法:家庭 HIV 检测(Home Access System)等。 3、尿液 HIV 抗体检测

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